利用BRET分析法，追蹤結構導引的人類opioid receptor family活性

生物發光共振能量轉移Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET)是一種用於監測體內分子間的交互作用的系統。BRET是一項先進且非破壞性的細胞基礎分析技術，非常適合用於蛋白質體學的應用，例如受體研究及訊號傳導路徑的追蹤。此分析方法是基於融合蛋白之間的非輻射能量轉移。BRET分析具有多項優勢：不會產生donor蛋白的photo-bleaching或photo-isomerization現象，不會受到細胞或微量盤的自體螢光(auto-fluorescence)干擾。
本研究主題為使用G protein dissociation與β-arrestin recruitment分析，建立一個經過設計且安全opioid藥物的研究框架。Opioids是一類能與體內opioid receptor結合，並產生止痛、鎮靜作用的天然、半合成或合成物質。研究對象包括人類opioid receptor family的WT與突變蛋白，並使用TRUPATH平台進行分析。TRUPATH平台是指一種用於研究G protein-coupled receptors(GPCR)訊號傳導的實驗平台，主要用來測量GPCR與不同G protein或β-arrestin的交互作用.其中BRET分析是在PHERAstar® FSX微量盤讀取儀進行。

閱讀完整文章👉點此