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FAQ-樣品製備

樣品製備FAQ

於樣品收集與準備過程中需要共同注意的問題(點擊展開收合)

1.我該如何選擇適合的樣品種類？不同的樣品要如何進行前處理？
選擇適合的樣品種類需根據您的實驗目標及檢測項目需求進行評估。不同樣品的準備方式會直接或間接影響檢測結果的可靠性與實驗的一致性，因此我們建議您可參考以下方式進行：

○ 參考檢測項目手冊 每個檢測方法都會有專門的樣品準備指引。依據手冊進行樣品前處理，可以最大程度保證樣品的完整性和數據的準確性，同時減少實驗過程中可能出現的誤差或失誤。

○ 確保樣品的品質與穩定性 嚴格按照手冊要求進行樣品收集、處理和保存（如溫度、時間等要求）。儘量避免多次解凍以防止樣品降解或特性的改變。

若您不確定應使用何種樣品或如何準備，歡迎隨時聯繫我們的專業團隊。我們將依據您的檢測需求，為您提供建議與支援，確保您的實驗達到最佳效果。

2.冷凍樣品有什麼需要注意的事項？

○ 採集後盡快冷凍樣品。

○ 如需長期儲存，建議分裝樣品以避免反覆解凍。

樣品收集與準備過程中可能遇到的問題─製備建議(點擊展開收合) 1.有沒有針對不同樣品類型的準備指南？

○ 稀釋與濃縮：多數樣品不需要濃縮，若需要建議低溫使用spin column concentrator濃縮。

○ 解凍後處理：樣品解凍後以約10,000 RPM 離心2-5分鐘，去除干擾檢測的顆粒物。
檢體類型        收集與保存   製備建議      
血清
(Serum)
  • 冷凍保存於-80°C
  • 避免多次凍融導致蛋白質降解
  • 建議使用 1X Blocking Buffer稀釋，也可直接使用未稀釋原液
  • 避免使用溶血檢體，溶血可能影響蛋白檢測並提高背景訊號
血漿
(Plasma)
  • 建議使用肝素或檸檬酸鈉作為抗凝劑
  • 冷凍保存於-80°C
  • 離心 10,000 RPM 2-5 分鐘去除顆粒物
  • 若檢測金屬結合蛋白 (如MMPs)，避免使用EDTA抗凝劑
  • 確保樣品沒有溶血，避免背景過高
細胞培養液或條件培養液
(Conditioned Media)
  • 2,000 RPM離心5分鐘後收集上清液
  • 冷凍保存於-80°C
  • 使用無血清或低血清 (0.2% FBS) 培養基
  • 若使用含血清培養基，建議準備未培養對照樣品
  • 血清中可能含有細胞因子、增殖因子等干擾物質
  • 針對細胞培養液的準備指南如下
    1. 將細胞接種到培養基中培養約 24-48 小時。
    2. 更換為無血清或低血清培養基（如 0.2% FCS/FBS），再次培養 48 小時。
    3. 收集上清液，將分裝的樣品儲存於  -80°C。
細胞裂解液
(Cell Lysate)
  • 建議新鮮配製
  • 冷凍保存於-80°C
  • 添加蛋白酶抑制劑以防止蛋白質降解
  • 避免使用1 mL或更少體積的樣品進行均質，以免蛋白變性
  • 製備前徹底清洗細胞並移除殘餘培養基
  • 針對細胞裂解液的準備指南
    1. 收集細胞
  • 貼附細胞：去除培養基液體以冰的1X PBS 洗滌兩次。
  • 懸浮細胞：使用微量離心機離心後收集細胞沉澱。
    1. 裂解細胞
  • 去除全部的 PBS，加入Lysis Buffer
  • 用pipette反覆混合，在冰上作用30分鐘並不時搖晃。
    1. 清除細胞碎屑
  • 離心後收取上清液，並測定蛋白濃度。分裝後儲存於 -80°C。
  • 可使用BCA方法定量蛋白濃度-若無法提供，我們可以協助測量，請與我們的團隊聯繫並取得相關服務資訊
組織裂解液
(Tissue Lysate)
  • 收集組織後盡快以1× PBS 洗滌並冷凍於-80°C
  • 添加蛋白酶抑制劑
  • 均質化後在冰上作用30分鐘，14,000g離心10分鐘
  • 稀釋至50-500 μg/mL
  • 製備過程中避免樣品加熱，並確保比例正確
  • 針對組織裂解液的準備指南
  • 組織均質化
  1. 將收集到的組織塊以冰的 1X PBS 洗滌兩次 (1,500rpm離心10 分鐘)
  2. 移除多餘的 PBS，將組織轉移至含有Lysis Buffer的試管中。
  3. 按照均質器的操作說明進行均質化處理。
  4. 用pipette反覆混合，在冰上作用30分鐘並不時搖晃。
  • 清除碎屑
  1. 離心後收取上清液，分裝後儲存於 -80°C。（將濃度調整至 1~ 5 μg/μL）
  • 可使用BCA方法定量蛋白濃度-若無法提供，我們可以協助測量，請與我們的團隊聯繫並取得相關服務資訊
尿液
(Urine)
  • 即時收集並冷凍於-80°C，避免多次凍融
  • 如有必要，可進行濃縮或去鹽處理
  • 檢測前需離心去除殘渣，確保樣品清澈
其他體液
  • 收集後立即冷凍保存於-80°C
  • 可根據檢測需求進行離心、去鹽或透析等處理
  • 確保蛋白濃度在檢測範圍內
 

2. 樣品需要準備多少的體積?

Working (Loading) volume 樣品稀釋倍數&準備量
C-Series Array (1-sample/membrane) 1000 μL 2-5X, 至少準備 250-600 μL
Q & G - Series Array (1-sample/glass well) 100 μL 2-5X, 至少準備 30-60 μL

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