2020/11/13 重新定義Western Blotting中的『標準』
您是否知道像JBC這樣的期刊都開始漸漸要求不要使用Housekeeping protein (HKP)進行Western Blot的標準化？已有越來越多的期刊都開始以更加嚴謹的標準來要求Western Blot DATA的呈現。儘管傳統上，我們已經使用Housekeeping Protein (HKP) 作為Normalization的標準數十年了，但隨著研究領域越來越細微，HKP可能會產生的實驗誤差也逐漸浮上檯面，這使得我們必須採用更多驗證以維持數據的正確性。
現在，利用樣品中總蛋白進行標準化的方法(Total Protein Normalization, TPN)逐漸獲得大家的認可，並被證明是一種可靠的Western Blot標準化方法。雖然相較於一般的蛋白質，Housekeeping Protein受到實驗影響的變化已是相對穩定，但依然還是有很多因素會造成HKP的改變，例如實驗條件、發育狀況、轉錄後調控、細胞週期的時期以及細胞或組織的型態與老化程度。而使用TPN便可將這些因素所造成的實驗誤差分散至所有的蛋白質，使標準化後的結果更加貼近真實結果。也因此在一些樣本個體差異較大的研究領域中，TPN變成為了定量西方點墨法的首選，像是幹細胞研究、神經科學研究、神經退化性疾病研究、發育生物學以及老化研究。
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