2022/06/13 hBM-MSCs EVs的免疫調節抗原特徵(下篇)- FiberCell系統可收集到相同質量的Exosomes產物
FiberCell中空纖維生物反應器被認為是連續大量生產細胞外囊泡(EVs)的重要工具,在2021年發布的一份綜合研究中,表明此系統可以收集到相同質量和數量的EVs,除了對於培養過程前、中、後期EVs的大小與濃度分析外,更進一步確認相關的表現性與功能性特徵。
研究人員發現,中空纖維生物反應器內部的人類骨髓間質幹細胞(hBM-MSCs),除了保持高活力,還保有其三系中胚層分化能力,並且同時表現MSC相關標記。其中CD9、CD63 和CD81在EVs生產過程中一直被檢測到,證實了hBM-MSC在生物反應器條件下產生的EVs身份。針對EV、幹細胞和免疫相關抗原的37個Epitopes進行偵測,不同的3個時間點(第1、13和25天)所收集的EVs,多帶有共同的Epitopes,且MSC 已知Epitopes也通過antibody-bead conjugates在 EV 樣品上檢測到,包括 CD44、CD146、CD29、MCSP、CD49E 和 CD105。第13天和第25天,CD105、CD49E、CD9、CD40、CD81、CD29 和 VEGF-A和Glycan-binding-lectins (ConA、LCA、AAL、ECL、PNA和RCA)的表現與第 1天有統計上的差異,這表示在第13-25天之間可能是一個理想的生產狀態,可獲得一致性EVs。
另外針對29 種細胞因子/趨化因子和生長因子(稱為炎症和免疫反應的生物標誌物),對EVs的內含量進行分析,並且在4個不同來源、不同的3個時間點(第2、14和24天)都檢測到 IL-6、IL-8 和 VEGF-A 因子。其中VEGF-A蛋白量從第 2 天(106.2±45.8 pg/mL/μg)到第24天(38.0 ± 10.2 pg/mL/μg)觀察到下降的趨勢 (p < 0.0001)。
這篇研究證實EVs會帶有其生產細胞的表面特徵,而且同時了解EVs內含訊息傳遞圖譜,表示由MSC產生的EVs可以通過釋放其內含物向細胞發出信號,從而影響免疫和炎症途徑。這些EVs都是經由FiberCell中空纖維生物反應器生產、收集而得的,利用本研究所使用的人類 MSC-EV 生產方法,可以生成具有低免疫原性和抗炎特性的EVs,用於未來的治療目的。
其它參考: "hBM-MSCs EVs的免疫調節抗原特徵(上篇)- FiberCell中空纖維生物反應器的連續生產"請點我。
(更多產品訊息請洽岑祥當區業務)
研究人員發現,中空纖維生物反應器內部的人類骨髓間質幹細胞(hBM-MSCs),除了保持高活力,還保有其三系中胚層分化能力,並且同時表現MSC相關標記。其中CD9、CD63 和CD81在EVs生產過程中一直被檢測到,證實了hBM-MSC在生物反應器條件下產生的EVs身份。針對EV、幹細胞和免疫相關抗原的37個Epitopes進行偵測,不同的3個時間點(第1、13和25天)所收集的EVs,多帶有共同的Epitopes,且MSC 已知Epitopes也通過antibody-bead conjugates在 EV 樣品上檢測到,包括 CD44、CD146、CD29、MCSP、CD49E 和 CD105。第13天和第25天,CD105、CD49E、CD9、CD40、CD81、CD29 和 VEGF-A和Glycan-binding-lectins (ConA、LCA、AAL、ECL、PNA和RCA)的表現與第 1天有統計上的差異,這表示在第13-25天之間可能是一個理想的生產狀態,可獲得一致性EVs。
圖一 針對EV、幹細胞和免疫相關抗原的37個Epitopes分析結果
另外針對29 種細胞因子/趨化因子和生長因子(稱為炎症和免疫反應的生物標誌物),對EVs的內含量進行分析,並且在4個不同來源、不同的3個時間點(第2、14和24天)都檢測到 IL-6、IL-8 和 VEGF-A 因子。其中VEGF-A蛋白量從第 2 天(106.2±45.8 pg/mL/μg)到第24天(38.0 ± 10.2 pg/mL/μg)觀察到下降的趨勢 (p < 0.0001)。
圖二 對hBM-MSC中空纖維生物反應器中產生的EVs經分析證實了免疫調節特徵
這篇研究證實EVs會帶有其生產細胞的表面特徵,而且同時了解EVs內含訊息傳遞圖譜,表示由MSC產生的EVs可以通過釋放其內含物向細胞發出信號,從而影響免疫和炎症途徑。這些EVs都是經由FiberCell中空纖維生物反應器生產、收集而得的,利用本研究所使用的人類 MSC-EV 生產方法,可以生成具有低免疫原性和抗炎特性的EVs,用於未來的治療目的。
其它參考: "hBM-MSCs EVs的免疫調節抗原特徵(上篇)- FiberCell中空纖維生物反應器的連續生產"請點我。
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